阳离子脂质(lipoplexes)和聚合物(polyplexes)是常用的非病毒基因递送系统。 Tee 技术(触发内体逃逸)结合并利用了两个实体的特性,以实现极其有效的核酸递送到细胞中。事实上,新一代脂多胺含有亲脂部分(例如脂质)和带电多胺部分(例如阳离子聚合物)。这些部分协同作用,确保紧密的核酸压缩和保护以及内体膜非常有效的去稳定,从而允许在胞质溶胶中释放大量核酸并摄取DNA核。特别关注可生物降解实体的合成。这样,转染试剂不会干扰细胞机制,每次实验都能保持高细胞活力,并避免任何潜在的副作用。
转染效率与高转基因表达水平或高基因沉默以及最小化细胞毒性相结合取决于多个关键参数。这些因素包括细胞类型、质粒 DNA 特征(大小、启动子、报告基因)和纯度、siRNA 序列和纯度、细胞培养条件(含或不含血清的培养基、细胞数量、无污染……)、核酸和试剂的量、转基因测定仅举几例。因此,需要根据待递送的核酸(DNA、siRNA、mRNA、ODN、shRNA 等)和所使用的细胞类型专门设计转染试剂,以达到最佳效率。
脂转染法特别适用于永生化细胞。
Tee 技术的主要优势是:
纳米颗粒中 DNA 的压缩被细胞有效内化
保护核酸免遭核酸酶降解
高效的膜去稳定和 DNA 递送
即使核酸含量低也能高效
生物降解性
该协议是一个非常简单的过程:
1. 准备 DNA 和试剂溶液。
2. 将它们混合在一起并孵育 20 分钟。
3. 添加到您的单元格中。