ozbiosciences:Magnetofection™ 技术简述

Magnetofection™ 是一种简单且高效的方法转染方法可转染原代细胞和难转染细胞。

Magnetofection™ 的原理是将核酸、转染试剂或病毒与特定的磁性纳米粒子结合起来。然后将所得的分子复合物浓缩并运输到由适当磁场支持的细胞中。通过这种方式，利用施加在基因载体上的磁力可以将所施加的全部载体剂量非常快速地集中在细胞上，从而使 100% 的细胞与有效的载体剂量接触，并促进细胞摄取。

它是如何工作的？

磁性纳米颗粒由氧化铁制成，可生物降解，并根据应用涂有特定的专有阳离子分子。它们与基因载体（DNA、siRNA、ODN、病毒等）的结合是通过盐诱导的胶体聚集和静电相互作用来实现的。然后，通过特定磁板产生的外部磁场的影响，磁性颗粒被浓缩到细胞上。遗传物质的细胞摄取是通过胞吞作用和胞饮作用这两个自然生物过程来完成的。因此，与破坏细胞膜、产生孔洞或电击细胞膜的其他物理转染方法相比，膜结构和结构保持完整。然后，根据所使用的制剂，通过不同的机制将核酸释放到细胞质中。

1. 首先是纳米颗粒上包覆的阳离子聚合物引起的质子海绵效应，促进内体渗透膨胀、内体膜破坏和细胞内 DNA 释放。

2. 其次是颗粒上包被的阳离子脂质使内体不稳定，通过细胞负性脂质的翻转和电荷中和将核酸释放到细胞中。

3. 第三个是使用病毒时通常的病毒机制。

磁性纳米颗粒的生物分布

可生物降解的阳离子磁性纳米粒子在推荐剂量甚至更高剂量下没有毒性。基因载体/磁性纳米颗粒复合物在 10-15 分钟后内化到细胞中，即比任何其他转染方法快得多。 24、48 或 72 小时后，大多数颗粒位于细胞质、液泡（细胞周围结构的膜）中，偶尔位于细胞核中。此外，磁性纳米粒子不影响细胞功能。

有哪些应用？

Magnetofection™ 是适用于所有类型核酸（DNA、siRNA、dsRNA、shRNA、mRNA、ODN...）、非病毒转染系统（转染试剂）和病毒的通用技术。

如何使用 Magnetofection™ 试剂？

该方案是一个非常简单的程序：
1. 在无血清培养基或缓冲液中稀释核酸或载体，并添加 Magnetofection™ 试剂。
2. 孵育 20-30 分钟。
3. 将这些复合物直接添加到细胞中。
4.施加磁场（将培养板放在磁力板上）。
5. 孵育5-20分钟，取出磁板并培养细胞直至测定。

需要特定的设备吗？

Magnetofection™ 要求是磁板专为此应用而设计。磁性板是一次性购买且可重复使用，因此您不需要与电穿孔或基因枪等方法相反的昂贵设备。基本上，所需的磁场是由特定的磁铁产生的。三种磁性板可供选择：超级磁性板、具有 96 个磁铁的磁性板和巨型磁性板。他们的设计允许产生异质磁场，磁化溶液中的纳米颗粒，形成非常强的梯度以吸引纳米颗粒并覆盖板的所有表面。该板可用 70% 乙醇清洗并在培养箱或机器人中使用。