与猪、牛、山羊、绵羊、豚鼠、兔、驴 IGFBP 发生反应
检测人类样本中的 IGFBP 和 IGF 受体。牛、猪、兔、豚鼠、绵羊、驴和山羊血清样品也获得了类似的结果。大鼠和小鼠血清在硝酸纤维素膜上仅获得微弱条带(参见:小鼠/大鼠蛋白质印迹试剂盒)。
试剂盒的试剂足以制备每个步骤中每种试剂250ml。这足以容纳 500 平方厘米的印迹膜。试剂盒中的每种试剂也可单独购买。
Reagent | Description | Quantity | Product Code |
A | 0.5 ml Biotinylated ligand: biotinylated human IGF-II, dilute 1 : 100 to 1 : 500 | 10 ug | BioIGF2-10 |
B | Quenching Buffer, 2-fold conc. | 125 ml | QB-125 |
C | Blocking/Dilution Buffer, 10 - fold conc. | 75 ml | BDB-75 |
D | Washing Buffer, 20-fold conc. | 125 ml | Product Code: WB-125 |
E | Streptavidin-POD-Conjugate, dilute 1:2500 - 1:5000 | 125 µl | Product Code: SPCON |
Detailed working instructions | Application Note IGF005 | ||
Human Western-ligand Blot | 1 Kit | Product Code: human-WLB |
我们的套件不提供基材,您可以使用常用的基材
我们已经成功测试了其他基材,例如 KPL、Pierce、GE Healthcare、Seramun、Kem-en-tec。
我们开发了一种缓冲系统,使我们手中的硝酸纤维素膜具有最佳的灵敏度,并且即使在室温下也具有长期的稳定性。也可以使用其他缓冲区,但有一些限制:
如果您使用牛血清白蛋白 (BSA) 进行封闭和/或稀释,请注意其质量。许多 BSA 制剂含有微量 IGFBP,这可能会影响 WLB 的质量(背景/信号比)。
文献中描述牛奶含有生物素化蛋白质,这可能会影响 WLB 的质量(背景/信号比)。我们测试了来自不同供应商和当地超市的脱脂奶粉,没有发现生物素化蛋白质。