对于大多数实验室来说,正确的决定取决于科学和成本的某种结合。需要考虑的一些问题是:
您需要多少材料以及需要多长时间?
早期探索型项目可能只需要有限数量的材料,或者您的工作流程可能一次仅使用几微克的抗体。利用多克隆生成对于这些情况非常有效。兔子是多克隆抗体的行业标准,因为它具有强大的免疫系统,并且可以根据需要灵活地一次生产多年的抗体。如果您需要预先大量的材料而不是长期使用,那么对较大的动物(例如山羊)进行免疫可能会有所帮助。
然而,如果您正在尝试生产用于有可能无限期使用的检测的试剂,那么单克隆生产可能更理想。
抗体的活性是否必须始终相同,或者某些批次间的差异在您的系统中是否可行?
通过多克隆生产,动物得到免疫,您的测试物品就成为最终收集到的一切。随着时间的推移,反应可能会发生变化或成熟,但可以通过在检测中使用一致量的抗体来减轻这种情况。
同时,单克隆生产的明确目的是执行多个筛选步骤,以找到表达适合您的检测反应的抗体的单个细胞系。只要能够保持稳定性,该细胞系就应该能够在您需要时表达抗体。最终一致性的最终保证是对抗体的可变区进行测序并将其生产为重组蛋白。
该项目有时间限制吗?
多克隆项目平均需要三个月的时间,而分离出具有所需性能的特定单克隆细胞系可能需要六个月的时间。此后生产重组蛋白形式的抗体可能还需要三个月或更长时间。
您是否已经拥有希望与新生成的材料并行使用的现有抗体?
无论您当前拥有的抗体是多克隆还是单克隆,请选择不同的物种来开发第二抗体。这样您就可以用单独的二抗进行探测并同时查看两种反应性。例如,在鸡、山羊或豚鼠中制备多克隆是最常选择与现有兔抗体并行使用的选项。
您的预算是多少?
由于固有的成本效益(平均单克隆成本约为平均多克隆成本的六倍),同时多种抗体的高通量需求很可能会利用多克隆生产。然而,对于早期诊断或治疗,以单克隆项目开始可能会更好地满足您的整体需求,并在项目加速方面带来红利。