SuperQuick RT MasterMix（For Real-time PCR）

本产品是专为 Real-time RT-PCR 而研发的快速逆转录试剂混合液。5× SuperQuick RT MasterMix中包含SuperQuickRT逆转酶、 Rnase Inhibitor、Random 6 mers、Oligo dT Primer、dNTP、RT Buffer 等从 RNA模板逆转录成 cDNA 第 一链所需的全部试剂。该产品的逆转录效率高，可对少量 RNA 模板进行良好 的逆转录反应，15 分钟即可完成荧光定量模板 cDNA***链合成。另外，逆转 录反应温度可以提高到 50℃，可通读 GC含量高和二级结构复杂的 RNA模板。 本试剂盒操作十分方便快捷，仅需加入 RNA 模板和水即可进行逆转录反应， 特别适合于高通量检测。

产品特点1．简便：即用型逆转录 Mix，只需加入 RNA 模板和水，便可进行反应。2．快速：15 分钟完成 cDNA 第一链合成。3．反转录效率高：反转录效率高于 90%。4．灵敏度高：pg 级模板也可以得到高质量的 cDNA。5．通读复杂模板：GC 含量高和二级结构复杂模板。注意事项1．在操作过程中应避免 Rnase 污染，防止 RNA 降解或实验中的交叉污染，建议操作人员带口罩和一次性手套并经常更换手套，使用专门的仪器和耗材。2．逆转录体系配制在冰上进行操作，防止 RNA 发生降解。试剂盒的 MasterMix使用后尽快置于-20℃保存，并尽量避免反复冻融。3．反应体系可倍比放大，10ul 反应体系可最大使用 1ug 总 RNA。4．对于二级结构复杂的 RNA 模板，建议在操作步骤之前，将模板 RNA 在 65℃孵育 5min 立刻置于冰上，短暂离心后进行下一步操作。使用方法1．将模板 RNA 在冰上解冻；将试剂盒组分在室温解冻后立刻置于冰上，使用前将每种溶液涡旋振荡混匀，并经短暂离心后使用。2．根据以下表格配制反应体系（反应液配制请在冰上进行），涡旋震荡混匀，短暂离心，使管壁上的溶液收集到管底。

注意：1） 如果总RNA量大于1ug，请按比例扩大反应体系。2）5×SuperQuick RT MasterMix中含有Oligo(dT)、Random primer、RnaseInhibitor、dNTPs、RT Buffer等。3．42 ℃孵育15分钟。注意：对于二级结构复杂或GC含量高的模板，可以提高逆转录温度至50℃，增强逆转录效率。4．85℃孵育5分钟，使逆转录酶失活。5．短暂离心后置于冰上，再进行后续Real-time PCR检测，如果需要长时间保存，请置于-20℃。注意：进行Real-time PCR反应时，逆转录产物的加量应不超过PCR反应总体积的1/10。