Pfu Polymerase (Pfu聚合酶)

Pfu DNA聚合酶来自超嗜热古生菌激烈热球菌，与其他热稳定聚合酶相比，具有优异的热稳定性和校正特性。其分子量为90 kD。它可以扩增高达2kb的DNA靶。拉伸速度为0.2 ~ 0.4 kb/min(70 ~ 75℃)。Pfu DNA聚合酶具有3’至5’核酸外切酶校对活性，使聚合酶能够纠正核苷酸错掺错误。这意味着Pfu DNA聚合酶产生的PCR片段比Taq产生的PCR插入片段具有更少的错误。在PCR反应中使用Pfu DNA聚合酶会产生平端PCR产物，这是克隆到平端载体的理想选择。Pfu DNA聚合酶对于需要高保真度DNA合成的技术是*的。

存储器缓冲区
20毫米Tris。盐酸(pH8.0)，100毫米KCl，3毫米氯化镁2、1mM DTT、0.1% Nonidet P-40、0.1%吐温20、0.2mg/ml BSA、50% (v/v)甘油。

10X Pfu缓冲器
200毫米Tris-HCl (pH8.8)，100毫米KCl，100毫米(NH4)2因此420毫米MgSO4、1% Triton X-100和1毫克/毫升BSA。

单位定义
一个酶单位(U)被定义为使用鲱鱼精DNA作为底物，在70℃下30分钟内催化10纳摩尔脱氧核糖核苷酸掺入酸不溶性物质所需的酶量。

A 2X mastermix Pfu聚合酶也是可用的。

Taq聚合酶也是可用的
 

特征

• 3’-5’核酸外切酶活性提供了低错误率
• 已知最耐热的DNA聚合酶之一
• 缺乏延伸酶活性意味着没有不想要的3’突出端
• 适合平端PCR克隆
• 最佳温度接近75℃
• 在98℃下孵育1小时后，活性为95%

应用程序

• 高保真PCR和引物延伸反应
• 用于克隆到平端载体的高保真PCR。
• 定点诱变。