高铁还原酶（FCR）测试盒

高铁还原酶（FCR）测试盒

微量法 100管/96样

正式测定前务必取2-978个预期差异较大的样本做预测定

测定意义：

高铁还原酶（ferric-chelate reductase, FCR）催化高价铁螯合物中的Fe3+还原为Fe2+，在部分物种铁元素的吸收中有重要作用。

测定原理：

FCR催化Fe3+还原为Fe2+，Fe2+和ferrozine反应显色，在562nm下有特征吸光值。

自备用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体6mL×1瓶，4℃避光保存;

试剂二：液体6mL×1瓶，4℃避光保存;

试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

按照组织质量（g）：水（mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL蒸馏水），进行冰浴匀浆。10000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

测定步骤：

1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至562nm，蒸馏水调零。

2. 工作液配制：将试剂一、二、三以1:1:1的比例混合。临用前配制，用多少配多少。

3. 在微量石英比色皿/96孔板中，加入50μL样本上清和150μL工作液，混匀，记录初始吸光值A1和30min后的吸光值A2。ΔA=A2-A1。

FCR活性计算:

a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下

标准曲线：y = 8.0014x + 0.0011，R2 = 0.9997；

1. 按样本质量计算

单位定义：每g样本每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCR（nmol/min/g 鲜重）=（△A-0.0011）÷ 8.0014×1000×V标÷(V样÷V样总×W)÷T

                       = 4.166×（△A-0.0011）÷W

2. 按样本蛋白浓度计算

单位定义：每mg蛋白每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCR（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0011）÷8.0014×1000×V标÷(V样÷V样总×Cpr)÷T

                        =4.166×（△A-0.0011）÷Cpr

V样总：加入提取液体积，1 mL；V样：反应中样品体积，50μL；V标：加入标准品体积 ，50μL；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；1000，μmol到nmol的转换系数。

b.用96孔板测定的计算公式如下

标准曲线：y = 4.0007x + 0.0011，R2 = 0.9997；y，吸光度

1. 按样本质量计算

单位定义：每g样本每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCR（nmol/min/g 鲜重）=（△A-0.0011）÷4.0007×1000×V标÷(V样÷V样总×W)÷T

                        =8.331×（△A-0.0011）÷W

2. 按样本蛋白浓度计算

单位定义：每mg蛋白每分钟产生1nmolFe2+-ferrozine定义为一个酶活力单位。

FCR（nmol/min/mg prot）=（△A-0.0011）÷4.0007×1000×V标÷(V样÷V样总×W)÷T

                        =8.331×（△A-0.0011）÷Cpr

V样总：加入提取液体积，1 mL；V样：反应中样品体积，50μL；V标：加入标准品体积 ，50μL；T：反应时间，30min；W：样品质量，g；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；1000，μmol到nmol的转换系数。

上海牧荣生物科技有限公司

1. 国内试剂耗材经销代理。

2. 国外试剂的订购。可提供欧美实验室品牌的采购方案。

3. 提供加急物流处理，进口货物，最快交期1-2周。

4. 进出口货物代理服务。

5. 公司代理众多有名生命科学领域的研究试剂、仪器和实验室消耗品品牌：CELL DATA,Alamanda Polymers， cstti，Click Chemistry tools，Nanoprobes，Ancell，NANOCS，Ambeed, Inc，SPEED BioSystems, LLC，Tulip Biolabs, Inc，Torrey Pines Biolabs，magsphere ,FabGennix International ,paratechs，Medicago,Oraflow,CWE,Wasatch Photonics, alphananote, It4ip, proteoform, Caprico等,重点合作品牌 Lee Biosolutions,chematech,Nanopartz,denovix,Atto tec,macrocyclics等。

6. 质量保证，所有产品都提供售后服务。付款方式灵活。公司坚持“一站式"服务模式，为客户全面解决实验、生产、开发需求。公司整合国际与国内资源，加强网络建设，提高公司内部运作效率，为客户提供方便、快捷的服务。

7. 公司突出创新思维，提高工作效能，减低运作成本，为客户提供优惠的价格。

高铁还原酶（FCR）测试盒