使用经典血液学染色剂时,在血液涂片载玻片上看到沉淀是一个常见问题,沉淀会干扰细胞分化,有时会导致误诊(如中毒性肉芽)。载玻片中出现沉淀物可能是由几种不同的程序问题引起的。检查您的程序,查看在使用Wright或Wright-Giemsa染色剂时,是否应该应用这些修正来消除血液学载玻片上的沉淀物。
1.在您的自动染色机中更换新鲜溶液
如果您的染色液、缓冲液或染色液/缓冲液混合溶液在您的设备中放置过久(或者您已经超过了特定的载玻片号,或者已经超过了理想的瓶外更换日期),它们可能会在您的设备中形成沉淀。从新鲜的解决方案开始。在您的方案中创建并维护一个定期更换这些溶液的时间表。
2.清洁你的设备
如果染色剂、染色剂/缓冲液或缓冲液已经放置了一段时间,它们可能会形成沉淀。要解决这个问题,请在自动染色机上运行一个清洗周期,然后从新鲜溶液开始。保持清洁计划可以提高载玻片染色的一致性,并防止沉淀物形成。
3.在添加到您的设备之前,稀释并过滤污渍
如果您观察到污渍中有沉淀,您可能需要稀释和过滤污渍。有时污渍放置太久,会从溶液中分离出来。如果密封不当,也可能在瓶中形成沉淀。用甲醇稀释5%的染色剂,摇匀,然后过滤。将其添加到您的机器中,并检查其准确性。
4.增加染色剂/缓冲液中染色剂的浓度
Wright和Wright-Giemsa染色剂会在水中沉淀,而水是血液学缓冲液的主要成分。因此,如果您在染色液/缓冲液中观察到沉淀,您可以尝试将染色液的浓度从1:10(10%染色液,90%缓冲液)增加到1:5 (20%染色液,80%缓冲液)。
5.在室温下储存或将染色剂置于室温下
如果染色剂是冷的(由于运输或储存),在使用前将其温热至室温。然后,在将染色剂添加到您的设备之前,摇匀染色剂,确保其没有分离。
对您的血液学染色方案进行这些调整将有助于防止沉淀或微粒转移到您的组织切片上。如果您仍然注意到您的染色剂或血液学载玻片有沉淀问题,请考虑更换新的染色剂提供商,以避免继续出现问题。
在Ethos Biosciences,我们提供一系列用于血液学的Wright、Wright-Giemsa和Quick染色剂。