肽标记策略
标记肽可以通过修饰分离的肽或在固相合成过程中结合标记来制备。用荧光团标记肽的常用策略包括:
肽合成过程中的标记-可以耐受解封闭程序的染料可以结合到肽链的氨基末端。
2.N端修饰:N端是指蛋白质或多肽链起始处的游离胺基(-NH2)。可以使用胺反应性琥珀酰亚胺酯荧光团对其进行共翻译修饰或翻译后修饰。
3.赖氨酸残基:赖氨酸残基的ε-氨基可以用胺反应性琥珀酰亚胺酯荧光团修饰。
4.C端修饰:C端是指蛋白质或多肽链末端的羧基(-COOH)。它可以在翻译后进行修饰,通常是在C端酰胺化之后。
5.如果肽链上有半胱氨酸,巯基反应蛋白标记可以共价标记合成肽。
6.非天然氨基酸可以在合成过程中结合到肽链中,然后通过生物正交反应(例如基于叠氮化物和炔烃的反应以及酮醛反应)用染料或其他探针标记。