AimPlex™ 多重检测技术怎么运行的？

AimPlex™ 多重检测技术利用按大小和不同荧光强度水平区分的多个珠群。 AimPlex 技术具有 4 和 5 微米两种尺寸的珠子，每种珠子尺寸（4S 和 5S）有 12 个荧光强度级别，只需15 µL 样品即可在一次反应中同时测量多达 24 种分析物。使用配备蓝色 488nm 和红色 635nm 激光器或仅配备 488nm 激光器的标准流式细胞仪测定反应中的珠群。珠分类染料的最大发射波长为 700 nm。
 
与夹心 ELISA 的原理类似，每个珠群与特定的捕获抗体结合，捕获样品中的目标蛋白质，例如细胞因子。通过针对蛋白质二级表位的生物素化抗体检测捕获的分析物的量，然后进行链霉亲和素-R-藻红蛋白处理。在配备有 488nm 激光器的流式细胞仪上对珠子上的 R-藻红蛋白的荧光强度进行定量，并使用 PE 通道检测器进行测量。通过将荧光信号与由已知浓度的蛋白质分析物的系列稀释产生的标准曲线的信号进行比较，可以获得样品中感兴趣的蛋白质的浓度。
 
测定程序包括 60 分钟抗原和捕获抗体缀合珠孵育步骤、30 分钟生物素化检测孵育步骤和 20 分钟链霉亲和素-PE 孵育步骤。每次孵育步骤后通过流通式过滤器底部微孔板清洗珠子可提供最高的信噪比。