借助我们的肽受体 easYmers®,您可以构建与您的项目相关的 MHC I 类存储库,并开始在您自己的实验室中生产 pMHC 复合物。有超过 50 种 HLA 同种异型可供选择。
所有 MHC I 类 easYmer® 分子均经过生物素化,允许您使用您喜欢的标签制备四聚体。冷冻保存,MHC I 类 easYmers® 稳定且肽可接受 24 个月;一旦与肽复合,所得单体可在冰箱中稳定保存多年。 我们建议您使用预测因子(例如NetMHC 系列或NetMHCpan)作为设计单体的辅助工具。如果目标特定肽-MHC I 类组合预计不会以足够低的 %Rank 结合,则该肽不支持稳定复合物形成的风险很高。因此,为了确保正确的肽加载和 CD8+ T 细胞的最佳染色,我们强烈建议您通过实验验证肽-MHC (pMHC) 复合物的成功形成。为此,easYmer 试剂盒包含一个基于 FACS 的简单方案,允许您验证正确的肽加载(单击此处了解方案)。 装载肽的 MHC 单体可以长期冷冻保存以供以后四聚化。当需要时,这些单体可以很容易地与标记的链霉亲和素(例如用于经典流式细胞术分析的荧光团标记或用于CyTOF分析的金属标记)四聚化。为了获得最佳的 CD8+ T 细胞 HLA 四聚体染色效果,请遵循我们的MHC I 类四聚体染色方案。 easYmers® 技术具有高度灵活性,适用于: 肽-MHC I 类相互作用的评估。 表位/新表位筛选——小规模四聚体生产,用于并行筛选大量不同的表位。 供体筛选——大规模四聚体生产,用于筛选大量(供体)样本中的单个表位。 50+ HLA-A | HLA-B |提供 HLA-C 同种异型 鼠标 H2-Db、H2-Kb 可用
将肽添加至 easYmer® 并孵育。添加链霉亲和素缀合物并对 T 细胞进行染色。