protean：BstI DNA 聚合酶(BstI-LF Exo-)描述

Bst DNA 聚合酶，大片段是来自克隆到大肠杆菌的嗜热脂肪芽孢杆菌的中等热稳定性酶。它具有嗜热逆转录酶活性，并且在各种反应缓冲液条件和镁离子浓度下均具有活性。该聚合酶表现出强大的链置换能力，使其成为等温扩增 (LAMP)、全基因组扩增 (WGA) 和多重置换扩增 (MDA) 的理想候选者。

Bst DNA 聚合酶（减去核酸外切酶）是一种 67 kDa 嗜热脂肪芽孢杆菌 DNA 聚合酶蛋白，具有 5'-3' 聚合酶活性、链置换活性和逆转录活性。没有可检测到的 3'-5' 核酸外切酶活性。浓度为10 U/ul。

应用

等温 DNA 扩增、LAMP、DNA 链置换扩增、全基因组扩增、对具有高 CG 含量和有问题的二级结构的 DNA 进行测序、从极少量的 DNA 模板 (10 fg) 进行快速测序和扩增。 LAMP 测定：2.5 ul 10x BST 缓冲液、0.8 ul MgSO4 (25 mM)、dNTP (10 mM)、4 ul 甜菜碱 (5M)、1.6 ul mecA FIP 引物 (10 mM)、1.6 ul mecA BIP 引物 (10 mM)、0.2 ul mecA F3 引物 (10 mM)、0.2 ul mecA B3 引物 (10 mM)、0.1 mg/ml BSA、1 ul BST 聚合酶、1 ul 模板 DNA，10， 5 ul 水。参考文献：Changguo Chen、Qiangyuan Zhu、Jianwei Mao、Yanjun Li (2017)：通过环介导等温扩增 (LAMP) 同时检测 mecA、nuc 和 femB 来鉴定耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)。

纯化方法

亲和层析。 Protean Ltd. 提供的酶是在符合 ISO 9001 和 ISO 13485 国际标准的认证环境中生产的，符合下游 GMP 认证流程的使用条件。

公式

储存缓冲液：10mM Tris (pH 7.5)、50mM KCl、1mM DTT、0.1mM EDTA、0.1% Triton、50% 甘油。 10x 反应缓冲液：专有优化缓冲液，含有 100mM Tris-HCl (pH 8,8)、(NH4)2SO4、KCl、MgSO4 和 1% Triton X-100。

特异性

脱氧核糖核酸、核糖核酸

贮存

储存在-20℃