D-荧光素是产生生物发光或光的荧光素酶的小分子底物。自然界中或通过化学合成产生的荧光素和类似物有多种类型。底物和酶存在于多种发光生物体中,包括萤火虫和甲虫。萤火虫荧光素与甲虫荧光素相同。
荧光素荧光素酶系统如何工作? D-荧光素的氧化可以产生光,但在没有酶和辅因子 ATP 的情况下,反应速度极慢。该酶催化其底物的化学反应产生光。另一种手性形式,L-荧光素,竞争性地抑制化学反应。
D-荧光素有什么用途?发光计和光学显微镜已被开发用于检测两步荧光素酶催化化学反应发出的光。荧光素酶蛋白可以在细胞和动物(主要是小鼠)中瞬时或稳定表达。随着荧光素荧光素酶ATP试剂、设备和基因工程的发展,萤火虫荧光素酶和荧光素已广泛应用于体外和体内报告基因检测,检测基因表达以及在细胞活力检测或激酶活性检测中检测细胞ATP水平。荧光素荧光素酶 ATP 检测试剂盒可市售。萤火虫荧光素酶和 D-荧光素的应用(包括体内成像)仍在扩大。
如何制备D-荧光素钾盐?尽管 D-荧光素是萤火虫和甲虫中产生的天然化合物,但化学合成的成本比从昆虫中提取生物合成化学物质便宜得多。市场上有D-荧光素游离酸、D-荧光素钾盐、D-荧光素钠盐。我们的合成 D-荧光素钾盐(目录号 MB000102-R70170 或 MB102)经过纯化,可去除脱氢荧光素和 L-荧光素(萤火虫荧光素酶的竞争性抑制剂)。该化学品的水溶性很大,可制成高浓度的储备液。