1.封闭将封闭溶液添加至样品中。去除封闭溶液。
2.一抗将一抗在适当的缓冲液中稀释,并添加至样品中。在合适的缓冲液清洗几次,
3.将两份PLA探针,以1:5的比例在适当的缓冲液中稀释,并添加至样品中。
4.在H2O中以1:5的比例稀释连接储液。在该溶液中以1:40比例稀释连接酶并将混合物添加至样品中。
5.在H2O中以1:5的比例稀释扩增储液。在该溶液中以1:80比例稀释聚合酶并将混合物添加至样品中。
6.成像准备使用含有DAPI的Duolink原位封固剂加载样品,等待约一刻钟,然后在荧光或共聚焦显微镜下进行分析。