带正电荷的 Nanogold®简介

带正电荷的 Nanogold®可以参与许多不同的标记反应。

如果您想要缀合的分子具有羧酸基团（例如肽中的C端），您可以使用肽合成中使用的反应将其与带正电荷的纳米金缀合：使用EDC（ 1-乙基）激活羧酸-3-[3-二甲基氨基丙基]碳二亚胺盐酸盐)和磺基-NHS；您可以从多种来源购买 EDC。 EDC 与待标记分子上的羧基反应，形成胺反应性 O-酰基异脲中间体。该中间体容易水解，使其在水溶液中的寿命较短。添加磺基-NHS (5 mM) 通过将胺反应性中间体转化为胺反应性磺基 -NHS 酯来稳定胺反应性中间体，从而提高 EDC 介导的偶联反应的效率。这种活化的磺基-NHS 酯随后很容易与氨基反应。

或者，带正电的 Nanogold® 上的氨基可以使用交联剂激活。显示了两个示例。首先，使用水溶性同双功能交联剂双（磺基-琥珀酰亚胺基）辛二酸酯（BS3） 来缀合肽的N端，其中C端已被保护。该过程的一个特点是它提供了相对较长的链接：BS3 的 C8 链被添加到带有胺的丙基上，该胺突出到 Nanogold® 颗粒配体壳的外表面之外。在第二个方案中，水溶性异双功能交联剂，磺基-琥珀酰亚胺基 4-[ N-马来酰亚胺基-甲基]-环己烷-1-羧酸酯 ( Sulfo -SMCC)，用于将胺与马来酰亚胺基团选择性地与硫醇反应。然后使用马来酰亚胺衍生物来标记硫醇化生物分子，例如含有半胱氨酸的肽。多种其他交联剂可用于将胺连接至不同的官能团；