Pierce™ BCA 蛋白质检测试剂盒简述

提供的试剂盒选项包括 Pierce 免稀释 BSA 蛋白质标准品，这是一组七个预稀释的 BSA 标准品，包装在多通道移液器友好的试管中。试管条包括一个空管，使用户能够添加自己的样品缓冲液以进行空白扣除。

BCA 蛋白质检测试剂盒的特点包括：
• 比色法— 目视估计或使用标准分光光度计或酶标仪在 562 nm 处进行测量
• 准确— 显示通过染料结合方法 (Bradford) 观察到的蛋白质间变异的一半
• 兼容—不受大多数离子型和非离子型去污剂典型浓度的影响
• 测定时间短— 孵育30分钟；比传统的 Lowry 方法更简单，速度快四倍
• 检测范围宽 — BSA 的线性工作范围为 20 至 2000 µg/mL
• 灵敏— 使用增强协议检测低至 5 µg/mL
•不再需要连续稀释— 套件选项包括稀释- 免费 BSA 蛋白质标准品，无需在生成标准曲线时进行连续稀释 测定原理 BCA 蛋白质

测定
结合在碱性介质中通过蛋白质将Cu 2+还原 为 Cu 1+的特性与高灵敏度以及亚铜阳离子 (Cu 1+）由二辛可宁酸（BCA）制成。第一步是铜与蛋白质在碱性环境中螯合，形成浅蓝色复合物。在这种称为缩二脲反应的反应中，含有三个或更多氨基酸残基的肽在含有酒石酸钠钾的碱性环境中与铜离子形成有色螯合物。

在显色反应的第二步中，BCA 与第一步中形成的还原（亚铜）阳离子发生反应。两个 BCA 分子与一个亚铜离子螯合产生深紫色反应产物。 BCA/铜复合物是水溶性的，并且随着蛋白质浓度的增加，在 562 nm 处表现出很强的线性吸光度。该复合物的灵敏度（检测下限）比第一个反应的淡蓝色灵敏约 100 倍。

该反应受到蛋白质氨基酸序列中四个氨基酸残基（半胱氨酸、胱氨酸、酪氨酸和色氨酸）的强烈影响。然而，与考马斯染料结合方法（即 Bradford）不同，通用肽主链也有助于颜色形成，有助于最大限度地减少蛋白质成分差异引起的变异性。