使用Invitrogen转染试剂需要注意什么？

　　

　　由于省掉了电转杯，转染过程也更为简化：只需将细胞和核酸吸入Neon移液器吸头中，再插入到移液器吸头架上，并按“Start”即可。转染过后，直接将细胞加入培养容器中。既没有繁琐的移液，也不需要清洗电转杯。而且，通用的试剂盒适用于所有细胞类型，不用购买多个试剂盒，也无需鉴定最佳缓冲液。当然，一次性使用的24K金电极吸头成本不低。因多次使用会导致金包被变薄，改变吸头的电导率，所以每个吸头最多只能使用两次。

　　

　　使用Invitrogen转染试剂需要注意什么？

　　1、转染操作时，以细胞融合度达90%-95%为佳；

　　2、使用高纯度的DNA有助于获得较高的转染效率；

　　3、制备转染复合物时要求用无血清培养基稀释DNA和转染试剂；

　　4、转染的时候培养基中不能添加抗生素；

　　5、试剂应该在4度保存，要注意避免多次反复长时间开盖；

　　6、初次使用应优化DNA浓度和阳离子脂质体试剂量以得到最大的转染效率。DNA和转染试剂的比例，通常推荐是1:2-1:3。

　　

　　转染后需要进行终止吗？

　　不需要。脂质体复合物可以稳定存在52个小时。如果在进行转染前没有进行细胞换液，为了保证细胞正常生长所需的营养，需要在4～6小时后换用新的培养基。但如果转染之前已进行过换液，则在脂质体转染后不需要进行再次换液。